Gibco血清的培養(yǎng)基配制及前處理說明

發(fā)布時(shí)間： 2021-09-11　　點(diǎn)擊次數(shù)： 2691次

　　培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件，Gibco血清培養(yǎng)時(shí)該如何選對培養(yǎng)基呢？

　　一、合成培養(yǎng)基的配制

　　1.根據(jù)細(xì)胞目錄中的說明，按下表選擇合適品牌及貨號的培養(yǎng)基干粉，用適量超純水充分溶解。

　　2.按要求添加碳酸氫鈉、谷氨酸鈉、HEPES等，充分?jǐn)嚢枋怪芙狻?/div>

　　3.調(diào)pH至7.2左右。

　　4.加水至最終體積。

　　5.在超凈臺中對溶液進(jìn)行濾過除菌，分裝入250 mL或500 mL玻璃瓶中，用翻帽塞塞緊瓶口。

　　6.瓶口封好，4℃冰箱貯存。

　　二、生長培養(yǎng)基的配制

　　除無血清培養(yǎng)之外，各種合成培養(yǎng)基在使用前需加入一定量的血清和抗菌素。

　　培養(yǎng)基分裝成小瓶(100-200 mL)以便使用，翻帽塞塞緊瓶口。

　　按如下比例配制：基本培養(yǎng)基占80%-90%，血清占10%-20%。按1%體積分?jǐn)?shù)加入雙抗貯存液(青霉素+鏈霉素)，使青霉素和鏈霉素的終濃度分別為100 U/mL和100μ/mL。

　　三、Gibco血清的處理

　　市場上出售的血清一般做了滅菌處理，但在使用前還應(yīng)做熱滅活處理，即通過加熱的方法破壞補(bǔ)體(近來也有觀點(diǎn)認(rèn)為熱滅活處理是不必要的)。

　　1.將血清加熱至56℃并保持30 min，其間要不時(shí)輕輕晃動(dòng)，使受熱均勻，防止沉淀析出。

　　2.處理后的血清貯存于4℃。

　　3.血清在使用前最好進(jìn)行篩選以掌握血清的質(zhì)量。

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